血泪教训，Western blot史上最全避雷手册。

晶彩制版 · 发表于 2023-3-3 14:32:31

这个观点以前也有人提过的，但是主流还是GAPDH或者β-actin。个人经验觉得不同梯度还是存在区别的。

一刻爱跳的心 · 发表于 2023-3-3 14:33:28

如果只是半定量分析，变性或非变性方法都可以。变性后的蛋白储存更方便持久。

邓礼明 · 发表于 2023-3-3 14:33:57

如果要放久一点再做WB半定量分析，还是建议变性蛋白。

妍小槿 · 发表于 2023-3-3 14:34:15

去我的收藏夹吃灰吧

王海滨 · 发表于 2023-3-3 14:34:49

老师，就是提完蛋白后先加热变性，再BCA测蛋白浓度，再用loading buffer 配制样品，是这样吗？

紫茶 · 发表于 2023-3-3 14:35:30

这可不能吃灰啊，每天必用哒[惊喜]

雨洛亦明城 · 发表于 2023-3-3 14:36:13

先测浓度，再加loading buffer ，最后决定是否加热变性。[惊喜]

回头潮 · 发表于 2023-3-3 14:37:10

现在还有人在用手洗胶片的办法显影吗……（从我读书到现在十年了啊
我的经验：买个仪器，成功率直接翻倍。要是买了Odysey，做蛋白修饰工作量直接减半。祝大家都有经费……

黄灰红 · 发表于 2023-3-3 14:37:20

我们经常遇到哑铃型条带，就是两头粗中间细，不知道作者有没有什么好的解决办法

自以为很帅 · 发表于 2023-3-3 14:38:15

确实还有相当一部分实验室用手工显影。其实现在的WB机器已经发展很好了，全程做起来甚至不超过3小时。人力永远是廉价的。

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